IGFBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421064

概要

Igfbp3は、インスリン様成長因子結合タンパク質3（IGFBP3）をコードしており、IGF-IおよびIGF-IIに結合してそれらの生体内利用能、受容体への結合（関与）、ならびにIGF軸を介した下流シグナル伝達を調節する分泌性レギュレーターです。IGFにより駆動されるPI3K–AKT経路およびMAPK/ERK経路の活性を制御することで、IGFBP3はマウスの複数臓器における細胞増殖、生存、分化、組織リモデリングに影響を与えます。さらにIGFBP3は、細胞外マトリックス成分や細胞表面パートナーとの相互作用を通じて、IGF依存性およびIGF非依存性の両面から、アポトーシスやストレス応答にも作用し得ます。Igfbp3の発現異常やIGF/IGFBPバランスの乱れは、成長制御の異常、代謝調節、炎症、がん化シグナルネットワークといった文脈でしばしば研究対象となります。

IGFBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgfbp3遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igfbp3内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igfbp3のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IGFBP3タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IGFBP3シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igfbp3欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IGFBP3の機能に不可欠なIgfbp3エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igfbp3ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IGFBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIGFBP3 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igfbp3遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IGFBP3 HDRプラスミド（m）および IGFBP3 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgfbp3ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgfbp3標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。