IGFBP3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421064

Descripción general

Igfbp3 codifica la proteína 3 de unión a los factores de crecimiento similares a la insulina (IGFBP3), un regulador secretado que se une a IGF-I e IGF-II para modular su biodisponibilidad, su interacción con los receptores y la señalización downstream a través del eje IGF. Al moldear la actividad de las vías PI3K–AKT y MAPK/ERK impulsadas por IGF, IGFBP3 influye en el crecimiento celular, la supervivencia, la diferenciación y la remodelación tisular en múltiples órganos del ratón. IGFBP3 también puede ejercer efectos dependientes e independientes de IGF sobre la apoptosis y las respuestas al estrés mediante interacciones con componentes de la matriz extracelular y socios en la superficie celular. La expresión desregulada de Igfbp3 o el desequilibrio IGF/IGFBP se estudian con frecuencia en contextos de control anómalo del crecimiento, regulación metabólica, inflamación y redes de señalización oncogénica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IGFBP3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Igfbp3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Igfbp3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Igfbp3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IGFBP3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Igfbp3 para la investigación de la señalización de IGFBP3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Igfbp3 críticos para la función de IGFBP3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Igfbp3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IGFBP3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IGFBP3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Igfbp3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IGFBP3 (m) y el plásmido HDR IGFBP3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Igfbp3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Igfbp3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.