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IGFBP1双切口酶质粒(h) | sc-400915-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP1双切口酶质粒(h2) | sc-400915-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IGFBP1 编码胰岛素样生长因子结合蛋白 1(insulin-like growth factor binding protein 1),这是一种分泌型调控因子,可与 IGF-I 和 IGF-II 结合,从而调节它们的生物可利用性、与受体的结合以及通过 PI3K–AKT 和 MAPK 通路介导的下游信号传导。IGFBP1 的表达受到代谢与激素信号的显著影响,包括胰岛素、糖皮质激素以及营养状态等,因此与肝脏葡萄糖稳态和全身能量平衡密切相关。通过缓冲(buffering)IGF 活性,IGFBP1 能在内分泌和旁分泌情境中塑造细胞增殖、生存与分化等程序。IGFBP1 水平的异常与代谢失衡有关,也与多种病理生理状态下观察到的 IGF 轴信号变化相关,这支持其作为研究生长因子信号与代谢机制时的关键节点与潜在指标。
IGFBP1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IGFBP1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IGFBP1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IGFBP1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IGFBP1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。