IFN-α5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-421042

概要

マウスのIfna5は、自然免疫による抗ウイルス防御を統括し、下流の獲得免疫応答を形成するI型インターフェロンであるインターフェロンα5（IFN‑α5）をコードします。IFN‑α5はIFNAR受容体複合体を介してシグナル伝達し、JAK–STAT経路を活性化することで、ウイルス複製を制限し、抗原提示を調節し、細胞生存プログラムを制御するインターフェロン刺激遺伝子（ISG）を誘導します。このサイトカイン軸は組織における炎症のトーンに影響を与え、RIG‑I/MAVSやcGAS–STING経路を含むパターン認識受容体シグナルとも交差します。I型インターフェロンシグナルの制御異常は、感染への感受性に関与するほか、自己免疫や腫瘍免疫微小環境に関連する免疫介在性炎症表現型にも関与するとされています。

IFN-α5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIfna5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Ifna5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Ifna5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IFN-α5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IFN-α5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Ifna5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IFN-α5の機能に不可欠なIfna5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Ifna5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IFN-α5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIFN-α5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Ifna5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IFN-α5 HDRプラスミド（m）および IFN-α5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIfna5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIfna5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。