Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HXK I Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401753-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HXK IO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HXK I (h) e o Plasmídeo Double Nickase HXK I (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HK1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HXK I Anticorpo (G-1): sc-46695
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HXK I Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401753-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HXK I Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401753-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O HK1 humano codifica a hexoquinase I (HXK I), uma enzima associada à membrana externa da mitocôndria que catalisa a fosforilação da glicose em glicose-6-fosfato, dependente de ATP, comprometendo a glicose com a glicólise e favorecendo a entrada na via das pentoses fosfato. Ao acoplar a utilização de glicose à demanda energética celular e à homeostase redox, a HXK I influencia o fluxo metabólico, a produção de NADPH e precursores biossintéticos que moldam a proliferação e as respostas ao estresse. O HK1 também participa da fisiologia mitocondrial por meio de interações que podem modular a sinalização apoptótica e vias de sobrevivência celular. Alterações na expressão ou na regulação de HK1 têm sido associadas à reprogramação metabólica observada em diversos contextos relevantes para doenças, incluindo neurodegeneração, lesão isquêmica e fenótipos glicolíticos associados ao câncer, tornando-o um alvo útil para estudos mecanísticos do metabolismo da glicose.
HXK I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HK1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HK1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HK1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HK1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.