HspBP1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406487

Descripción general

HSPBP1 codifica HspBP1, un factor de intercambio de nucleótidos y co-chaperona que regula el ciclo de chaperonas HSP70/HSC70 al modular el intercambio de ATP/ADP y la liberación de proteínas cliente. A través de sus interacciones con chaperonas moleculares, HspBP1 contribuye a la proteostasis, a la señalización de respuesta al estrés y al control de calidad de proteínas mal plegadas o dañadas que, de otro modo, podrían acumularse y alterar la homeostasis celular. La desregulación de las redes de chaperonas, incluido el equilibrio de cofactores de HSP70, se asocia con frecuencia a cambios en el recambio proteico y la tolerancia al estrés en contextos como la neurodegeneración y la biología del cáncer, lo que convierte a HSPBP1 en un nodo útil para estudios mecanísticos. En células humanas, la perturbación de HspBP1 puede ayudar a definir cómo el plegamiento asistido por chaperonas se interseca con las vías de degradación de proteínas y la remodelación adaptativa al estrés.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HspBP1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HSPBP1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HSPBP1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HSPBP1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HspBP1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HSPBP1 para la investigación de la señalización de HspBP1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HSPBP1 críticos para la función de HspBP1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HSPBP1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HspBP1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HspBP1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HSPBP1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HspBP1 (h) y el plásmido HDR HspBP1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HSPBP1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HSPBP1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.