HSP 40-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-403819-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP 40-4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSP 40-4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSP 40-4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DNAJA1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP 40-4 Anticorpo (KA2A5.6): sc-59554
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP 40-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-403819-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 40-4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-403819-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DNAJA1 codifica o cochaperona humano da família HSP40, HSP 40-4 (também conhecido como Hdj2), uma proteína com domínio J que estimula a atividade ATPase da HSP70 para apoiar o dobramento, redobramento e o controle de qualidade de proteínas. Por meio de interações com a HSP70 e proteínas cliente, DNAJA1 contribui para a proteostase no citosol e em interfaces associadas a organelas, influenciando respostas ao estresse, o tráfego proteico e vias de degradação como o sistema ubiquitina–proteassoma. A desregulação de redes de chaperonas envolvendo DNAJA1 tem sido associada a alterações na tolerância celular ao estresse proteotóxico, com relevância para a biologia do câncer e para a neurodegeneração, nas quais a carga de proteínas mal dobradas e a sinalização de estresse são proeminentes. A função de DNAJA1 também é estudada no contexto de interações hospedeiro–patógeno e da estabilidade de vias de sinalização, refletindo seu papel na manutenção de complexos proteicos funcionais.
HSP 40-4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DNAJA1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DNAJA1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DNAJA1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DNAJA1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.