Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HSP 105 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402155-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HSP 105O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HSP 105 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HSP 105 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HSPH1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HSP 105 Anticorpo (B-7): sc-74550
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HSP 105 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HSP 105 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPH1 codifica a proteína de choque térmico HSP 105, uma chaperona molecular de alto peso molecular induzida por estresse proteotóxico, que ajuda a prevenir a agregação de proteínas e favorece o reenovelamento de proteínas mal dobradas no citosol. A HSP 105 coopera com os sistemas de chaperonas HSP70/HSP40 e contribui para redes de proteostase ligadas à resposta ao choque térmico, à função do sistema ubiquitina–proteassoma e à recuperação celular após estresse térmico ou oxidativo. Ao estabilizar proteínas sob estresse, HSPH1 influencia a resistência à apoptose, a progressão do ciclo celular e programas de sinalização adaptativos ao estresse. A atividade de chaperonas desregulada e a expressão elevada de HSPH1 têm sido associadas a contextos de transformação maligna e a outros estados de desequilíbrio da proteostase, tornando-o relevante para estudos mecanísticos de tolerância ao estresse e controle de qualidade proteica.
HSP 105 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HSPH1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HSPH1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HSPH1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HSPH1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.