Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) HSP 105: sc-402155-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HSP 105 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HSP 105 (h) y el plásmido de doble nickasa HSP 105 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HSPH1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HSP 105 Anticuerpo (B-7): sc-74550
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HSP 105 | sc-402155-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HSP 105 | sc-402155-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HSPH1 codifica la proteína de choque térmico HSP 105, una chaperona molecular de alto peso molecular inducida por estrés proteotóxico que ayuda a prevenir la agregación de proteínas y favorece el replegamiento de proteínas mal plegadas en el citosol. HSP 105 coopera con los sistemas de chaperonas HSP70/HSP40 y contribuye a redes de proteostasis vinculadas a la respuesta al choque térmico, la función del sistema ubiquitina–proteasoma y la recuperación celular tras estrés térmico u oxidativo. Al estabilizar proteínas bajo estrés, HSPH1 influye en la resistencia a la apoptosis, la progresión del ciclo celular y programas de señalización adaptativos al estrés. La actividad de chaperonas desregulada y la expresión elevada de HSPH1 se han asociado con contextos de transformación maligna y otros estados con desequilibrio de la proteostasis, lo que lo hace relevante para estudios mecanísticos de tolerancia al estrés y control de calidad proteica.
HSP 105 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HSPH1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HSPH1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HSPH1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HSPH1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.