HRC Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420947-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HRCO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HRC (m) e o Plasmídeo Double Nickase HRC (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hrc. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HRC Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420947-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HRC Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420947-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Hrc de camundongo codifica a proteína ligante de cálcio rica em histidina (HRC), um componente luminal do retículo sarcoplasmático que modula a dinâmica de armazenamento e liberação de cálcio no músculo estriado. A HRC interage com componentes-chave da maquinaria de acoplamento excitação–contração, incluindo a recaptação de Ca2+ mediada pela SERCA e a liberação de Ca2+ dependente do receptor de rianodina, moldando assim os transientes citosólicos de Ca2+ e a sinalização a jusante. Por meio de seu papel na homeostase do cálcio, a HRC está ligada a vias que regulam a contratilidade dos miócitos, respostas ao estresse e programas transcricionais dependentes de Ca2+. A disfunção da HRC tem sido associada a alterações na fisiologia cardíaca e do músculo esquelético e é frequentemente estudada no contexto da arritmogênese e de fenótipos celulares relevantes para cardiomiopatias.
HRC O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hrc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hrc. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hrc. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hrc interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.