HoxC8 Plasmide Double Nickase (h): sc-405407-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HoxC8 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HoxC8 Double Nickase Plasmid (h) e il HoxC8 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HOXC8. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HoxC8 Antibody (1H2): sc-517007
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HoxC8 Plasmide Double Nickase (h) | sc-405407-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HoxC8 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-405407-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXC8 codifica il fattore di trascrizione homeobox HoxC8, un regolatore di legame al DNA specifico per sequenza che contribuisce a organizzare l’asse antero-posteriore durante l’embriogenesi e a guidare programmi di differenziamento nei tessuti derivati dal mesoderma e dalla cresta neurale. HoxC8 modula reti geniche che controllano le decisioni di destino cellulare, la morfogenesi e programmi trascrizionali specifici di tessuto tramite interazioni tra HOX e cofattori e una regolazione dipendente dalla cromatina. Un’espressione deregolata di HOXC8 è stata riportata in molteplici tipi di tumore ed è associata a stati trascrizionali alterati legati a proliferazione, migrazione e transizione epitelio-mesenchimale, rendendolo un nodo utile per studiare la riprogrammazione dello sviluppo e la segnalazione oncogenica. Inoltre, l’attività di HOXC8 interseca vie che governano il rimodellamento della matrice extracellulare e la specificazione di linea, supportando studi meccanicistici in ambito di sviluppo, biologia del cancro e regolazione trascrizionale.
HoxC8 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HOXC8 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HOXC8. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HOXC8. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HOXC8 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.