HoxB13 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401878-NIC

HOXB13 codifica o fator de transcrição homeobox HoxB13, um regulador de ligação ao DNA específico de sequência que ajuda a estabelecer o padrão ântero-posterior e controla programas de diferenciação nas linhagens urogenitais e da próstata. Ao modular redes transcricionais a jusante de vias de sinalização do desenvolvimento, o HoxB13 influencia decisões de destino celular, a maturação epitelial e a expressão gênica específica de tecidos. A atividade desregulada de HOXB13 e alterações na circuitaria transcricional têm sido associadas à biologia da próstata e à reprogramação oncogênica, tornando-o um alvo relevante para o estudo da plasticidade de linhagem e de estados regulatórios gênicos associados a tumores. Na pesquisa biomédica, HOXB13 é comumente investigado por seus papéis no controle transcricional, na regulação dependente de cromatina e em efeitos dependentes do contexto sobre proliferação e diferenciação.

HoxB13 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HOXB13 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HOXB13. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HOXB13. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HOXB13 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.