HoxA11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405264

Visão geral

HOXA11 codifica o fator de transcrição homeobox HoxA11, um regulador de ligação ao DNA específico de sequência que controla programas de padronização do desenvolvimento e de diferenciação mesenquimal. Em células humanas, o HoxA11 contribui para redes transcricionais que governam a morfogénese dos membros e do trato urogenital, e está implicado na decidualização do estroma endometrial por meio de interações dependentes do contexto com a sinalização de hormonas esteroides e com o remodelamento da cromatina. A expressão desregulada de HOXA11 ou alterações nas suas paisagens regulatórias têm sido associadas a distúrbios reprodutivos e anomalias do desenvolvimento, e perturbações do cluster HOX são características recorrentes em múltiplos tipos de cancro, nos quais podem influenciar a proliferação e a identidade de linhagem. Como regulador transcricional nuclear, o HoxA11 oferece um ponto de entrada acessível para dissecar circuitos de regulação génica e transições de estado epigenético em modelos relevantes para o desenvolvimento e para a doença.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HoxA11 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HOXA11 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HOXA11, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HOXA11 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HoxA11.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HOXA11 para a investigação da sinalização de HoxA11, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HOXA11 críticos para a função HoxA11
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HOXA11 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HoxA11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HoxA11 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HOXA11. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HoxA11 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HoxA11 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HOXA11 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HOXA11 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.