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Hox11CRISPR激活质粒(h) | sc-404662-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Hox11CRISPR激活质粒(h2) | sc-404662-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
TLX1(Hox11)是一种同源盒转录因子,调控胚胎模式形成与谱系指定,并在造血分化程序中发挥重要作用。Hox11 通过在 HOX 反应元件处结合 DNA,调节与发育信号传导和染色质重塑相交织的转录网络,从而控制细胞增殖与命运决定。TLX1 表达失调与发育相关基因表达状态的改变有关,并与 T 细胞急性淋巴细胞白血病相关,这支持将其作为研究致癌性转录重编程的关键节点。在人类细胞模型中,TLX1 是一个便于操控的调控因子,可用于研究 HOX 驱动的基因调控回路以及情境依赖的分化表型。
Hox11 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TLX1的表达。
Hox11 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TLX1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TLX1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Hox11表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TLX1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Hox11的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TLX1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Hox11通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。