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hnRNP U双切口酶质粒(m) | sc-424561-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
hnRNP U双切口酶质粒(m2) | sc-424561-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Hnrnpu 编码 hnRNP U,这是一种广泛表达于细胞核的 RNA/DNA 结合蛋白,能够作为核糖核蛋白复合体的支架,并参与染色质组织。hnRNP U 通过将新生转录本连接到核内结构与转录机器,参与 pre-mRNA 加工、可变剪接以及基因表达调控。它还可通过与长链非编码 RNA 及染色质相关因子的相互作用,介入基因组稳定性、RNA 代谢以及与细胞周期相关的转录程序等通路。HNRNPU 相关的 RNA 加工与核内组织发生失调与神经发育表型及神经元兴奋性改变有关,因此在神经系统生物学与基因调控机制研究中具有重要意义。
hnRNP U 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hnrnpu 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hnrnpu内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hnrnpu的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hnrnpu基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。