hnRNP A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-418346
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- hnRNP A3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico hnRNP A3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
hnRNP A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-418346 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
HNRNPA3 codifica a ribonucleoproteína nuclear heterogênea A3 (hnRNP A3), uma proteína ligante de RNA que se associa a pré-mRNAs e a transcritos maduros para regular o splicing alternativo, a estabilidade do mRNA e o transporte nucleocitoplasmático. A hnRNP A3 participa da montagem de complexos ribonucleoproteicos e ajuda a coordenar programas de expressão gênica ligados ao processamento de RNA e à tradução. A desregulação de membros da família hnRNP é frequentemente associada a alterações no metabolismo de RNA, na dinâmica dos grânulos de estresse e em vias de proteostase. Esses processos são relevantes para a biologia de doenças, nas quais a regulação pós-transcricional aberrante e proteínas ligantes de RNA propensas à agregação contribuem para a disfunção celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO hnRNP A3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene HNRNPA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do HNRNPA3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do HNRNPA3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína hnRNP A3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de HNRNPA3 para a investigação da sinalização de hnRNP A3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) HNRNPA3 críticos para a função hnRNP A3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos HNRNPA3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo hnRNP A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo hnRNP A3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus HNRNPA3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo hnRNP A3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR hnRNP A3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia HNRNPA3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo HNRNPA3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.