HMG-I/HMG-Y Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-420879-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HMG-I/HMG-YO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HMG-I/HMG-Y (m) e o Plasmídeo Double Nickase HMG-I/HMG-Y (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hmga1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HMG-I/HMG-Y Anticorpo (D-12): sc-393213
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HMG-I/HMG-Y Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-420879-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HMG-I/HMG-Y Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-420879-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hmga1 codifica a proteína arquitetural associada à cromatina HMG-I/HMG-Y, um fator de ligação ao DNA do tipo AT-hook que remodela a estrutura local da cromatina e facilita a montagem de enhanceossomos em regiões regulatórias ricas em AT. Ao modular o acesso de fatores de transcrição e a organização da cromatina em níveis superiores, a HMG-I/HMG-Y influencia programas de expressão gênica que governam a progressão do ciclo celular, a diferenciação e a transcrição responsiva ao estresse, incluindo vias a jusante de MAPK e de outros sinais mitogênicos. Em modelos murinos, a atividade de Hmga1 é frequentemente examinada no contexto da regulação do desenvolvimento e do controle epigenético de redes transcricionais específicas de linhagem. A desregulação da função de HMGA1/HMG-I/HMG-Y tem sido associada a estados transcricionais aberrantes ligados à transformação oncogênica e à plasticidade celular alterada, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de regulação gênica relevantes para doenças.
HMG-I/HMG-Y O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hmga1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hmga1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hmga1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hmga1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.