Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400735-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HMG-1/HMGB1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HMG-1/HMGB1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HMG-1/HMGB1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HMGB1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HMG-1/HMGB1 Anticorpo (D-3): sc-518191
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400735-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HMG-1/HMGB1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400735-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HMGB1 (HMG-1) codifica uma proteína de ligação ao DNA associada à cromatina, altamente conservada, que curva o DNA e organiza complexos nucleoproteicos, influenciando a transcrição, a replicação, a recombinação e o reparo do DNA. No núcleo, a HMGB1 participa de vias de estabilidade do genoma, incluindo o reparo por excisão de bases e respostas a quebras de dupla fita, enquanto sua liberação extracelular pode funcionar como um padrão molecular associado a dano (DAMP) que modula a sinalização imune inata. Por meio de interações com receptores como RAGE e TLRs, a HMGB1 conecta o estresse celular a programas inflamatórios que moldam microambientes tumorais e respostas a lesão tecidual. A atividade e a localização desreguladas da HMGB1 têm sido associadas à biologia do câncer, à autoimunidade e à patologia inflamatória, sustentando seu uso como um nó mecanístico em estudos de dinâmica da cromatina e imunometabolismo.
HMG-1/HMGB1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HMGB1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HMGB1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HMGB1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HMGB1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.