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HLA-DRβ1CRISPR激活质粒(h) | sc-406727-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
HLA-DRβ1CRISPR激活质粒(h2) | sc-406727-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
HLA-DRB1 编码 HLA-DR II 类主要组织相容性复合体(MHC)中的 β 链,与 α 链组成异源二聚体受体,将来源于细胞外的肽段呈递给 CD4+ T 细胞。通过调控抗原加工与呈递,HLA-DRβ1 有助于在专业抗原呈递细胞中塑造 T 细胞启动、外周耐受以及由细胞因子驱动的免疫网络动态。HLA-DRB1 的变异会影响肽结合特异性并改变免疫识别,使该位点与多种免疫介导及炎症性疾病的易感性和严重程度相关联。作为适应性免疫的关键枢纽,HLA-DRβ1 常被用于研究自体抗原呈递、病原体应答以及免疫遗传学分层等问题。
HLA-DRβ1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HLA-DRB1的表达。
HLA-DRβ1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的HLA-DRB1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于HLA-DRB1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性HLA-DRβ1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的HLA-DRB1位点,并能够研究内源性位点上依赖于HLA-DRβ1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HLA-DRB1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟HLA-DRβ1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。