Histone H3.3A Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-416802-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Histone H3.3AO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Histone H3.3A (h) e o Plasmídeo Double Nickase Histone H3.3A (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para H3F3A. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Histone H3.3A Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-416802-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone H3.3A Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-416802-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O H3F3A codifica a variante de histona H3.3A, independente de replicação, um componente central dos nucleossomos que é depositado em genes transcritos ativamente, elementos regulatórios, telómeros e locais de dano no DNA. Por meio de uma incorporação específica da variante, a H3.3 ajuda a moldar a acessibilidade da cromatina e coordena a regulação transcricional, a atividade de enhancers e a memória epigenética, além de influenciar a reparação do DNA e a estabilidade do genoma. A H3.3A participa em redes de remodelação da cromatina e de modificações de histonas que se articulam com processos como respostas ao stress de replicação e programas de destino celular. Alterações recorrentes em H3F3A e a deposição desregulada de H3.3 têm sido associadas a estados anómalos de cromatina em contextos de cancro e de desenvolvimento, tornando este locus um ponto central para estudos mecanísticos da desregulação epigenética.
Histone H3.3A O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus H3F3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de H3F3A. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função H3F3A. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com H3F3A interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.