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Histone Deacetylase 6 (HDAC6)CRISPR激活质粒(m) | sc-420820-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
Histone Deacetylase 6 (HDAC6)CRISPR激活质粒(m2) | sc-420820-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
Hdac6 编码组蛋白去乙酰化酶 6(HDAC6)。HDAC6 主要定位于细胞质,通过去除 α-微管蛋白、HSP90 等关键非组蛋白底物上的乙酰基来调控蛋白质稳态。HDAC6 通过调控微管动力学、聚集体(aggresome)形成、自噬以及应激颗粒生物学,将细胞骨架重塑与蛋白质稳态和细胞应激反应整合在一起。HDAC6 依赖的通路影响细胞内运输、细胞迁移、先天免疫信号传导以及对错误折叠蛋白负荷的应答。HDAC6 活性失调与神经退行性变、炎症以及与癌症相关的过程有关,因此常被用作疾病模型研究中的关键机制节点。
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Hdac6的表达。
Histone Deacetylase 6 (HDAC6) CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Hdac6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Hdac6转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 6 (HDAC6)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Hdac6位点,并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 6 (HDAC6)的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Hdac6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 6 (HDAC6)通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。