Histone Deacetylase 6 (HDAC6)CRISPR激活质粒(h): sc-400314-ACT

HDAC6 编码组蛋白去乙酰化酶 6（Histone Deacetylase 6），这是一种主要定位于细胞质的去乙酰化酶，可调控包括 α-微管蛋白（α-tubulin）、cortactin 和 HSP90 在内的非组蛋白底物的乙酰化水平，从而影响微管动态、细胞运动性以及依赖分子伴侣的蛋白质稳态。通过调控泛素依赖的聚集体（aggresome）形成与自噬清除，HDAC6 将细胞骨架重塑与错误折叠蛋白引发的应激反应整合在一起。HDAC6 还可调节与先天免疫和炎症性转录程序相关的信号通路，包括对 NF-κB 调控下游输出的影响。HDAC6 活性或表达的失调与癌细胞表型、神经退行性变相关的蛋白毒性应激以及免疫介导的疾病机制有关，因此是开展机制研究的一个有价值的关键节点。

Histone Deacetylase 6 (HDAC6) CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性HDAC6的表达。

Histone Deacetylase 6 (HDAC6) CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的HDAC6基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于HDAC6转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Histone Deacetylase 6 (HDAC6)表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的HDAC6位点，并能够研究内源性位点上依赖于Histone Deacetylase 6 (HDAC6)的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在HDAC6表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Histone Deacetylase 6 (HDAC6)通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。