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Histone Deacetylase 4 (HDAC4)双切口酶质粒(m) | sc-431586-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Hdac4 基因编码组蛋白去乙酰化酶4(HDAC4),它属于IIa类HDAC,可在细胞核与细胞质之间穿梭,从而将信号依赖性的磷酸化与染色质调控相耦联。HDAC4主要通过与MEF2等因子结合发挥转录共抑制子作用,调节依赖乙酰化的基因程序,从而控制肌发生、神经元活动调控的转录以及骨骼发育。其亚细胞定位与活性整合了Ca2+/钙调蛋白依赖性激酶与14-3-3信号通路,将细胞外刺激与分化和应激反应的表观遗传调控连接起来。在小鼠模型中,HDAC4依赖的转录网络失衡与神经发育及神经退行性相关表型、心脏重塑和肌肉病理有关,因此HDAC4可作为研究染色质与信号传导机制的关键节点。
Histone Deacetylase 4 (HDAC4) 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Hdac4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Hdac4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Hdac4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Hdac4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。