HIF1a Lentiviral Activation Particles (m): sc-420856-LAC

マウスのHif1aは、低酸素誘導因子1α（HIF1a）をコードしており、低酸素下で安定化してARNTと二量体を形成し、低酸素への細胞適応を協調的に制御するbHLH-PAS型転写因子です。HIF1aは低酸素応答エレメントを介して、解糖系代謝、血管新生シグナル、赤血球産生、鉄恒常性、細胞生存に関わる遺伝子を調節し、PI3K–AKT–mTORおよびMAPK経路からの入力を統合します。その活性はプロリン水酸化とVHL依存的ユビキチン化によって制御され、酸素感知とプロテオスタシスが結び付けられています。HIF1aシグナルの破綻は、腫瘍における低酸素生物学、虚血関連のストレス応答、慢性炎症、代謝リモデリングなどに広く関与しており、酸素依存的な転写プログラムの機構研究における中核的ノードとなっています。

HIF1a レンチウイルス活性化粒子（m）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なHif1aの発現上昇を可能にします。

HIF1a レンチウイルス活性化粒子（m）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、Hif1a転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性HIF1aの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のHif1aゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。