Hemoglobin δ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401567-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Hemoglobin δO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Hemoglobin δ (h) e o Plasmídeo Double Nickase Hemoglobin δ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HBD. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Hemoglobin δ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401567-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Hemoglobin δ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401567-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HBD codifica a subunidade delta da hemoglobina (hemoglobina δ), uma proteína transportadora de oxigénio que contém heme e que se associa à alfa-globina para formar a hemoglobina A2 em células eritroides. A sua expressão está estreitamente ligada aos programas de eritropoiese e de biossíntese do heme, integrando-se com a regulação dos genes das globinas no locus da β-globina e com as vias de maturação dos glóbulos vermelhos. Variações em HBD e no seu contexto regulatório podem influenciar a composição da hemoglobina e são estudadas em conjunto com os genes das globinas do tipo β em doenças que afetam o equilíbrio da hemoglobina e a fisiologia dos eritrócitos. Como marcador dentro do cluster das globinas, o HBD também é útil para investigar o controlo do locus, a comutação durante o desenvolvimento e a regulação transcricional em modelos de diferenciação hematopoética.
Hemoglobin δ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HBD em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HBD. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HBD. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HBD interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.