HECTD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431500-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HECTD1O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HECTD1 (m) e o Plasmídeo Double Nickase HECTD1 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Hectd1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HECTD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431500-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HECTD1 Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431500-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Hectd1 codifica a HECTD1, uma ligase E3 de ubiquitina do tipo HECT que promove a regulação dependente de ubiquitina da estabilidade de proteínas e do output de sinalização em células de camundongo. Por meio da ubiquitinação de substratos, a HECTD1 contribui para o controle da proteostase e modula vias associadas à polaridade celular, à dinâmica do citoesqueleto e à sinalização responsiva ao estresse, que moldam programas de proliferação e diferenciação. Estudos genéticos e funcionais relacionaram a atividade alterada de HECTD1 a defeitos no desenvolvimento embrionário e na morfogênese tecidual, ressaltando sua relevância para a biologia do desenvolvimento e para os mecanismos subjacentes a fenótipos congênitos. Como um nó dentro do sistema ubiquitina–proteassoma, a HECTD1 é frequentemente estudada por sua influência na comunicação cruzada entre vias e na remodelação dependente do contexto das redes de sinalização celular.
HECTD1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Hectd1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Hectd1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Hectd1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Hectd1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.