HCN3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407361-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HCN3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase HCN3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase HCN3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para HCN3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HCN3 Anticorpo (TLL6C5): sc-58621
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HCN3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-407361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HCN3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-407361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCN3 codifica um canal ativado por hiperpolarização e regulado por nucleotídeos cíclicos, que contribui para a corrente Ih ao conduzir uma corrente de entrada mista de Na⁺/K⁺ durante a hiperpolarização da membrana. Ao integrar a dependência de voltagem com a modulação por nucleotídeos cíclicos, o HCN3 ajuda a regular o potencial de membrana em repouso, a excitabilidade rítmica e a responsividade à sinalização neuromoduladora em tipos celulares excitáveis. O canal participa de processos eletrofisiológicos ligados à atividade tipo marcapasso e a padrões de disparo neuronal, e interage com vias dependentes de cAMP que ajustam a condutância de membrana. Alterações na atividade de canais HCN têm sido associadas a fenótipos de excitabilidade desregulada relevantes para contextos de pesquisa sobre arritmias e crises epilépticas, sustentando estudos mecanísticos da função de canais iônicos em modelos celulares relevantes para doenças.
HCN3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HCN3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HCN3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HCN3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HCN3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.