Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Hck Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420810
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Hck El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Hck, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Hck Anticuerpo (G-4): sc-166463
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Hck Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420810 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
El gen Hck de ratón codifica la cinasa de células hematopoyéticas, una tirosina cinasa no receptora de la familia Src, enriquecida en linajes mieloides, que acopla señales de inmunorreceptores e integrinas a redes de fosforilación aguas abajo. Hck participa en vías vinculadas a receptores Fc y receptores tipo Toll que coordinan la remodelación del citoesqueleto, la fagocitosis, la degranulación y la producción de mediadores inflamatorios, convergiendo en nodos como PI3K/AKT, MAPK y NF-κB. La actividad alterada de Hck se ha asociado con una señalización innata desregulada y un comportamiento aberrante de las células mieloides en afecciones inflamatorias y en modelos de leucemia. Como cinasa de señalización proximal, Hck se utiliza ampliamente para investigar los mecanismos que controlan la activación, la adhesión y la migración de macrófagos y neutrófilos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Hck (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Hck en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Hck junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Hck tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Hck.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Hck para la investigación de la señalización de Hck, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Hck críticos para la función de Hck
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Hck para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Hck CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Hck CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Hck. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Hck (m) y el plásmido HDR Hck (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Hck para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Hck definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.