H2-D^d 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-420759-NIC

H2-D1은 마우스 MHC class I 중쇄인 H2-Dd를 암호화하며, β2-마이크로글로불린과 결합하고 내인성 펩타이드를 CD8+ T 세포에 제시하는 항원 제시 과정의 핵심 구성요소입니다. H2-Dd는 제시되는 펩타이드 레퍼토리와 T 세포 수용체 결합을 형성함으로써 면역 감시, 세포독성 효과기 활성화, 말초 관용을 조절합니다. H2-Dd의 기능은 프로테아좀 분해, TAP 의존적 펩타이드 수송, 그리고 펩타이드 로딩 복합체 구성요소에 의해 매개되는 ER 내 로딩 등 항원 처리 경로와 연동됩니다. H2-D1의 변이 또는 실험적 조절은 마우스 모델에서 동종면역반응, 이식 면역생물학, 종양 면역원성, 바이러스 감염에 대한 숙주 반응을 연구하는 데 널리 활용됩니다.

H2-Dd 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 H2-D1 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 H2-D1 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 H2-D1의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, H2-D1 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.