Gγ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407524
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Gγ 5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Gγ 5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Gγ 5 Anticorpo (3B8): sc-517161
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Gγ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407524 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GNG5 codifica a subunidade humana Gγ5, um componente central das proteínas G heterotriméricas que conectam receptores acoplados à proteína G (GPCRs) ativados à sinalização a jusante. Ao se associar a subunidades Gβ, os dímeros Gβγ regulam enzimas efetoras e canais iônicos, moldando vias de segundos mensageiros como adeninil ciclase/AMPc, fosfolipase Cβ/IP3–DAG e sinalização PI3K–AKT. A sinalização dependente de Gγ5 influencia processos como migração celular, excitabilidade de membrana e remodelamento do citoesqueleto, e a atividade alterada das vias de GPCR/proteína G é frequentemente implicada na biologia do câncer, inflamação e disfunções cardiovasculares e neurológicas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Gγ 5 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GNG5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GNG5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GNG5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Gγ 5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GNG5 para a investigação da sinalização de Gγ 5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GNG5 críticos para a função Gγ 5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GNG5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Gγ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Gγ 5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GNG5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Gγ 5 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Gγ 5 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GNG5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GNG5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.