Gα 15 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h2): sc-403266-KO-2

개요

GNA15는 인간의 이종삼량체 G 단백질 α 소단위인 Gα15를 암호화하며, 다양한 G 단백질 연결 수용체(GPCR)를 인산화효소 Cβ(PLCβ) 활성화로 연결하는 범용적(promiscuous) Gq 계열 매개자입니다. 수용체가 활성화되면 Gα15는 이노시톨 삼인산(IP3) 및 디아실글리세롤(DAG) 신호, 세포내 Ca²⁺ 동원, 단백질 키나아제 C(PKC) 활성, 그리고 분비·화학주성·염증 반응을 형성하는 하위 전사 프로그램을 촉진합니다. 이 신호 축은 MAPK를 비롯한 다른 2차 전달자 경로와도 교차하여, 면역 및 조혈 환경 전반에서 세포 활성화 상태에 영향을 미칩니다. 변화된 GPCR–Gα15 결합과 조절 이상이 있는 칼슘 의존성 신호는 암 및 염증 관련 표현형과 연관된 것으로 보고되어 왔으며, 수용체 리와이어링과 신호 통합의 기전을 연구하는 데 활용 근거를 제공합니다.

Gα 15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)는 human 세포주에서 GNA15 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 GNA15 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 GNA15의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Gα 15 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Gα 15 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 GNA15 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Gα 15 기능에 중요한 GNA15 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 GNA15 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Gα 15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 Gα 15 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 GNA15 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Gα 15 HDR 플라스미드 (h) 및 Gα 15 HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 GNA15 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 GNA15 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.