GRO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420697
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRO1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRO1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRO1 Anticorpo (S-19): sc-80516
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420697 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Cxcl1 de camundongo codifica a GRO1, uma quimiocina CXC secretada que sinaliza principalmente via CXCR2 para promover a quimiotaxia e a ativação de neutrófilos e outras populações mieloides. A GRO1 participa da sinalização imune inata, amplifica redes de citocinas inflamatórias e contribui para a ativação endotelial e a extravasação de leucócitos por meio de vias ligadas a NF-κB e MAPK. A expressão desregulada de CXCL1/GRO1 está associada a lesão tecidual inflamatória, alterações na defesa do hospedeiro e mudanças no microambiente relevantes para a biologia de infecções e do câncer. Em sistemas experimentais, Cxcl1 é amplamente utilizado para investigar gradientes de quimiocinas, tráfego de leucócitos e remodelamento impulsionado pela inflamação.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRO1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Cxcl1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Cxcl1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Cxcl1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRO1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Cxcl1 para a investigação da sinalização de GRO1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Cxcl1 críticos para a função GRO1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Cxcl1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GRO1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Cxcl1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRO1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GRO1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Cxcl1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Cxcl1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.