Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GRHL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404946
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRHL3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRHL3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GRHL3 Anticorpo (C-12): sc-398838
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRHL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404946 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GRHL3 (fator de transcrição grainyhead-like 3) é um regulador transcricional específico de sequência que coordena a diferenciação epitelial, a formação de barreira e programas gênicos responsivos a feridas. Ele ajuda a manter a homeostase epidérmica ao modular a proliferação de queratinócitos e redes de diferenciação terminal, e interage com vias que controlam a polaridade celular, a adesão e o controle transcricional de genes estruturais e de junção. A atividade desregulada de GRHL3 tem sido associada a defeitos do desenvolvimento e a patologias epiteliais, e padrões de expressão alterados são relatados em estudos de epitélios escamosos e de estados transcricionais associados a carcinomas. Como fator nuclear que molda a expressão gênica epitelial, GRHL3 é frequentemente investigado em modelos de morfogênese tecidual, respostas a estresse e comprometimento de linhagem.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRHL3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GRHL3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GRHL3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GRHL3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRHL3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GRHL3 para a investigação da sinalização de GRHL3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GRHL3 críticos para a função GRHL3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GRHL3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRHL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GRHL3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GRHL3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRHL3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GRHL3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GRHL3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GRHL3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.