granzyme K Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407038
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- granzyme K O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico granzyme K, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:granzyme K Anticorpo (GM6C3): sc-56125
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
granzyme K Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407038 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
GZMK codifica a granzima K, uma serina protease do tipo tripsina armazenada nos grânulos de linfócitos citotóxicos e liberada nas sinapses imunes para modular as respostas das células-alvo e a sinalização inflamatória. A atividade da granzima K está associada a programas efetores citotóxicos, à remodelação proteolítica de substratos intracelulares e ao crosstalk com vias apoptóticas e de resposta ao estresse, que influenciam o dano tecidual e a regulação imune. Na imunidade humana, a expressão de GZMK é característica de células T CD8+ ativadas e de subpopulações de células NK, sendo frequentemente utilizada como marcador de ativação imune e de diferenciação citotóxica. A expressão desregulada de GZMK tem sido associada a microambientes inflamatórios e a patologias mediadas pelo sistema imune, sustentando seu estudo em contextos de infecção, autoimunidade e imunologia de tumores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO granzyme K (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene GZMK em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do GZMK, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do GZMK na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína granzyme K.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de GZMK para a investigação da sinalização de granzyme K, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) GZMK críticos para a função granzyme K
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos GZMK para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo granzyme K Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo granzyme K Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus GZMK. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo granzyme K Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR granzyme K (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia GZMK para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo GZMK definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.