GRAF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403652
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GRAF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GRAF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GRAF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-403652 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
ARHGAP26 codifica a GRAF, uma proteína ativadora de GTPase (GAP) que regula negativamente a sinalização da família Rho para coordenar a remodelação do citoesqueleto de actina, o tráfego de membranas e alterações na forma celular. Por meio de sua atividade GAP e de interações com reguladores endocíticos e do citoesqueleto, a GRAF conecta vias dependentes de Rho à endocitose mediada por clatrina e à dinâmica de adesão, influenciando a migração e a polaridade celular. Alterações na função de ARHGAP26 têm sido associadas a um controle desregulado do citoesqueleto em processos relacionados ao câncer e também estão implicadas em neoplasias hematológicas por meio de rearranjos gênicos recorrentes, sustentando a investigação de seu papel na reprogramação de sinalização e na transformação celular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GRAF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene ARHGAP26 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do ARHGAP26, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do ARHGAP26 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GRAF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de ARHGAP26 para a investigação da sinalização de GRAF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) ARHGAP26 críticos para a função GRAF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos ARHGAP26 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GRAF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GRAF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus ARHGAP26. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GRAF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GRAF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia ARHGAP26 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo ARHGAP26 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.