Plásmido Doble Nickase (m) GPR92: sc-436329-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GPR92 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR92 (m) y el plásmido de doble nickasa GPR92 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Lpar5. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GPR92 | sc-436329-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GPR92 | sc-436329-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Lpar5 codifica el receptor murino del ácido lisofosfatídico GPR92, un GPCR de clase A que convierte señales lipídicas extracelulares en respuestas intracelulares de segundos mensajeros. Tras su activación, GPR92 puede acoplarse a proteínas G heterotriméricas para regular la producción de AMPc, la señalización de la fosfolipasa C con movilización de Ca²⁺ y la actividad de la vía MAPK/ERK aguas abajo, modulando la migración celular, la supervivencia y los programas de expresión génica inflamatoria. La señalización LPA–GPR92 se ha relacionado con la comunicación neuroinmunitaria y con respuestas inflamatorias periféricas, y la desregulación de la señalización lipídica mediada por GPCR es relevante en modelos de dolor, activación inmunitaria y remodelación tisular. Estas características hacen de Lpar5 una diana útil para estudiar la biología de mediadores lipídicos y las redes de señalización dependientes de GPCR en sistemas murinos.
GPR92 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Lpar5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Lpar5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Lpar5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Lpar5 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.