GPR84 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-401953

概要

GPR84は、中鎖脂肪酸によって活性化されるGタンパク質共役受容体（GPCR）をコードしており、骨髄系細胞に豊富に発現することから、脂質の感知と自然免疫シグナル伝達を結び付ける分子として位置付けられています。刺激を受けると、GPR84はGPCRを介した経路を作動させ、セカンドメッセンジャーのシグナル伝達や、その下流でサイトカイン産生、走化性、マクロファージ活性化を制御する転写プログラムを調節します。本受容体は、炎症に伴う代謝リモデリングや、組織微小環境における免疫細胞の分極化の文脈で研究されてきました。GPR84活性の変化は、炎症性および線維性疾患の各種モデルで報告されており、免疫代謝経路を検証するための機構的な要所（ノード）としての有用性が示唆されています。

GPR84 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPR84遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPR84内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPR84のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR84タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR84シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPR84欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR84の機能に不可欠なGPR84エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPR84ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR84 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR84 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPR84遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR84 HDRプラスミド（h）および GPR84 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPR84ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPR84標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。