Plásmido Doble Nickase (h) GPR20: sc-407471-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GPR20 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPR20 (h) y el plásmido de doble nickasa GPR20 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a GPR20. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GPR20 | sc-407471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GPR20 | sc-407471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR20 codifica un receptor huérfano acoplado a proteína G (GPCR) que está enriquecido en el sistema nervioso central y se considera que modula la señalización intracelular a través de proteínas G heterotriméricas y de vías posteriores de segundos mensajeros como cAMP/PKA y MAPK/ERK. Al influir en la transducción de señales mediada por receptores, GPR20 puede afectar la comunicación neuronal, los programas de diferenciación celular y las respuestas transcripcionales que integran señales extracelulares. La desregulación de la señalización de los GPCR, incluidos cambios en la expresión o actividad de receptores huérfanos, se ha investigado en el contexto de la biología del neurodesarrollo y los trastornos neuropsiquiátricos, así como en sistemas más amplios donde las redes de GPCR moldean las transiciones de estado celular. Como receptor de membrana con anotación limitada de ligandos, GPR20 se estudia con frecuencia mediante perturbación genética para definir la conectividad de las vías y funciones específicas del contexto.
GPR20 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GPR20 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GPR20. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GPR20. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GPR20 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.