Date published: 2026-7-11

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GPR172B Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-407324-NIC

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Fichas de dados
  • alvos específicos: human
  • 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
  • GPR172BO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
  • Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
  • Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
  • O Plasmídeo Double Nickase GPR172B (h) e o Plasmídeo Double Nickase GPR172B (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para SLC52A1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
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    GPR172B Plasmídeo duplo de Nickase (h)

    sc-407324-NIC
    20 µg
    $410.00

    SLC52A1 codifica o transportador humano de riboflavina RFVT1, também conhecido como GPR172B, uma proteína de membrana que medeia a captação celular de vitamina B2, precursora dos cofatores flavínicos FMN e FAD. Ao controlar a disponibilidade intracelular de riboflavina, o GPR172B influencia o metabolismo redox dependente de flavoproteínas, a produção de energia mitocondrial e as respostas ao estresse oxidativo. A atividade do RFVT1 sustenta vias bioquímicas, incluindo a β-oxidação de ácidos graxos e o transporte de elétrons, que requerem enzimas dependentes de FAD/FMN. Alterações no transporte de riboflavina e na homeostase de flavinas têm sido associadas à disfunção metabólica e a fenótipos neuromusculares ligados ao comprometimento da utilização da vitamina B2.

    GPR172B O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus SLC52A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de SLC52A1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função SLC52A1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

    Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com SLC52A1 interrompido.

    Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.