GPR142 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-415656

概要

GPR142は、代謝に関連する組織で高発現し、栄養素センシングと関連づけられているオーファン受容体／クラスA GPCRであるGタンパク質共役受容体142をコードします。活性化されると、GPR142は三量体Gタンパク質と共役してセカンドメッセンジャーシグナル伝達やカルシウム依存性経路を調節し、ホルモン分泌およびより広範な代謝恒常性に影響を及ぼします。転写研究および遺伝学的研究により、GPR142は内分泌・代謝表現型と関連づけられており、糖代謝調節や膵島機能に関係する経路も含まれます。細胞表面受容体として、GPCRシグナル伝達の解析、リガンド探索、ならびに受容体駆動性の転写プログラムを解明するための扱いやすい標的となります。

GPR142 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるGPR142遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、GPR142内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、GPR142のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR142タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR142シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、GPR142欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR142の機能に不可欠なGPR142エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、GPR142ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR142 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびGPR142 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、GPR142遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR142 HDRプラスミド（h）および GPR142 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGPR142ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGPR142標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。