GPR119 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-433515

概要

Gpr119はGPR119をコードしており、GPR119はクラスAに属するGPCRで、膵島細胞や腸管のエンテロエンドクリン細胞集団に豊富に発現しています。これらの細胞では主にGsシグナルと共役し、細胞内cAMPを上昇させます。この経路は、インクレチン分泌やインスリン分泌動態、さらに糖・脂質恒常性の広範な制御に影響する栄養感知応答を支えます。免疫組織および代謝組織においても、GPR119依存的シグナル伝達は細胞のエネルギーバランスの調節や、腸と膵臓の間のホルモンを介したクロストークの調整に関与することが示されています。そのため、GPR119関連ネットワークの異常は、肥満や糖尿病に関連する経路を含む代謝表現型や、内分泌細胞機能の観点から研究されています。

GPR119 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるGpr119遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Gpr119内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Gpr119のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、GPR119タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、GPR119シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Gpr119欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• GPR119の機能に不可欠なGpr119エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Gpr119ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• GPR119 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびGPR119 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Gpr119遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  GPR119 HDRプラスミド（m）および GPR119 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはGpr119ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のGpr119標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。