gp91phox Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-419890-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- gp91phoxO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase gp91phox (m) e o Plasmídeo Double Nickase gp91phox (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Cybb. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
gp91phox Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-419890-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
gp91phox Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-419890-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene Cybb de camundongo codifica a gp91phox (NOX2), a subunidade catalítica de membrana do complexo NADPH oxidase de fagócitos, que transfere elétrons do NADPH para o oxigênio molecular para gerar superóxido e, a jusante, espécies reativas de oxigênio. Essa explosão oxidativa sustenta a defesa antimicrobiana, a sinalização dependente de redox e a regulação de respostas inflamatórias por meio de vias que influenciam a maturação do fagossomo e a produção de citocinas. A atividade da gp91phox requer a montagem com a p22phox e fatores citosólicos como p47phox, p67phox e GTPases Rac nas membranas celulares. A interrupção da produção de EROs dependente de Cybb é amplamente utilizada como modelo de função imune inata alterada e de mecanismos de estresse oxidativo relevantes para fenótipos de imunodeficiência e inflamação em sistemas murinos.
gp91phox O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Cybb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Cybb. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Cybb. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Cybb interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.