Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GP-39 Antibody (A-10): sc-393590. Western blot analysis of GP-39 expression in MCF7 whole cell lysate. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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GP-39双切口酶质粒(h): sc-402147-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GP-39 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GP-39双切酶质粒（h）和GP-39双切酶质粒（h2）编码针对CHI3L1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：GP-39: sc-393494，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GP-39双切口酶质粒(h) | sc-402147-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GP-39双切口酶质粒(h2) | sc-402147-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CHI3L1 编码 GP-39（YKL-40），这是一种分泌型的几丁质酶样糖蛋白，虽无酶活性，但可结合细胞外基质成分并调节细胞–基质相互作用。GP-39 由巨噬细胞、中性粒细胞、软骨细胞、成纤维细胞以及肿瘤相关基质细胞产生，可影响炎症信号传导、组织重塑、血管生成程序及与纤维化相关的过程。它常在细胞因子驱动的通路背景下被研究，例如 IL-6/STAT3、NF-κB 以及与 TGF-β 相关的重塑过程，也涉及创伤修复和慢性炎症微环境。CHI3L1 表达失调与关节炎及纤维化疾病生物学、哮喘及其他气道炎症状态、神经炎症以及癌症进展表型相关，因此是研究“炎症–重塑”耦联机制的一个有用关键节点。
GP-39 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 CHI3L1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对CHI3L1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏CHI3L1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了CHI3L1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。