Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
GP-39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402147
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GP-39 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GP-39, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GP-39 Anticorpo (D-11): sc-393494
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GP-39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402147 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
CHI3L1 codifica a GP-39 (YKL-40), uma glicoproteína secretada da família das proteínas semelhantes à quitinase que não possui atividade enzimática, mas modula a organização da matriz extracelular, a adesão celular e a remodelação tecidual. A GP-39 é produzida por diversos tipos celulares, incluindo macrófagos, neutrófilos e células do tipo fibroblasto, e está associada à sinalização inflamatória e às interações entre o estroma e o sistema imune. Está implicada na regulação de processos angiogênicos e fibróticos e é frequentemente estudada em contextos de inflamação crônica e renovação anômala da matriz. A expressão desregulada de CHI3L1 tem sido associada a diversos fenótipos relevantes para doenças, incluindo estroma associado ao câncer, neuroinflamação e estados inflamatórios metabólicos e das vias aéreas, o que a torna um nó útil para pesquisas de vias e de mecanismos de biomarcadores.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GP-39 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene CHI3L1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do CHI3L1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do CHI3L1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GP-39.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de CHI3L1 para a investigação da sinalização de GP-39, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) CHI3L1 críticos para a função GP-39
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos CHI3L1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GP-39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GP-39 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus CHI3L1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GP-39 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GP-39 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia CHI3L1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo CHI3L1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.