GnRHR Lentiviral Activation Particles (h): sc-401783-LAC

ヒトの **GNRHR** は、ゴナドトロピン放出ホルモン受容体（GnRHR）をコードしている。GnRHRはクラスAに属するGタンパク質共役受容体（GPCR）で、下垂体のゴナドトローフ細胞において視床下部由来のGnRHシグナルを伝達し、黄体形成ホルモン（LH）および卵胞刺激ホルモン（FSH）の合成・分泌を調節する。リガンド結合により、GnRHRは主としてGq/11と共役してPLCβを活性化し、IP3とDAGの産生を介して細胞内Ca2+濃度を上昇させるとともに、PKC依存的シグナル伝達を作動させ、下流のMAPK/ERK経路を調節する。このシグナル軸は、厳密に制御された転写プログラムを通じて、生殖内分泌のタイミング、ステロイド産生のフィードバック機構、ならびに性腺発達を統合的に制御する。GNRHRの発現やシグナル伝達の破綻は、低ゴナドトロピン性性腺機能低下症や思春期発来時期の異常などを含む生殖内分泌疾患と関連することが示唆されており、下垂体ホルモン調節機構を研究するうえでの機序的な手掛かりとなる。

GnRHR レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なGNRHRの発現上昇を可能にします。

GnRHR レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、GNRHR転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性GnRHRの発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のGNRHRゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。