Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Glyoxalase I Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401914-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Glyoxalase IO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Glyoxalase I (h) e o Plasmídeo Double Nickase Glyoxalase I (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GLO1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Glyoxalase I Anticorpo (D-5): sc-133214
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Glyoxalase I Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401914-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glyoxalase I Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401914-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O GLO1 humano codifica a glioxalase I, uma metaloenzima citosólica que catalisa a desintoxicação do metilglioxal dependente de glutationa, convertendo intermediários hemithioacetal em S‑D‑lactoilglutationa. Essa atividade é central para o sistema da glioxalase, que limita o acúmulo de dicarbonilas reativas e dos produtos finais de glicação avançada (AGEs) a jusante, ligando o GLO1 ao equilíbrio redox celular, à proteostase e às respostas ao estresse metabólico. A perturbação da função da glioxalase I pode alterar o estresse carbonílico associado à glicólise e influenciar vias de sinalização e de dano envolvendo glicação, estresse oxidativo e inflamação. Alterações na expressão ou na atividade de GLO1 têm sido estudadas em contextos como complicações relacionadas ao diabetes, neurodegeneração e metabolismo tumoral, como um indicador da capacidade de desintoxicação de dicarbonilas.
Glyoxalase I O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GLO1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GLO1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GLO1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GLO1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.