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GluR-1双切口酶质粒(m) | sc-420679-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GluR-1双切口酶质粒(m2) | sc-420679-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Gria1 编码 AMPA 型谷氨酸受体亚基 GluR-1(GluA1),是中枢神经系统快速兴奋性突触传递的核心决定因素。含 GluR-1 的受体通过活动依赖性的转运与磷酸化来调控突触强度,从而支持长时程增强(LTP)及其他形式的突触可塑性。该信号通路与 Ca2+ 依赖性的级联反应相互交织,包括 CaMKII/PKA/PKC 以及下游的转录程序,这些过程共同塑造神经元兴奋性与回路重塑。AMPAR 功能失调及 GRIA1 表达改变与神经发育和神经精神表型以及癫痫易感性相关,因此 Gria1 是开展谷氨酸能神经传递机制研究的重要靶点。
GluR-1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Gria1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Gria1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Gria1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Gria1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。