Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
GLUD1/2 Antibody (C-10): sc-515542. Western blot analysis of GLUD1/2 expression in untreated HeLa (A), chemically-treated HeLa (B, C), untreated K-562 (D) and chemically-treated K-562 (E) whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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GLUD1双切口酶质粒(h): sc-402187-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- GLUD1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- GLUD1双切酶质粒（h）和GLUD1双切酶质粒（h2）编码针对GLUD1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
GLUD1双切口酶质粒(h) | sc-402187-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLUD1双切口酶质粒(h2) | sc-402187-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLUD1 编码线粒体谷氨酸脱氢酶 1，这是一种催化谷氨酸可逆性氧化脱氨生成 α-酮戊二酸和氨的酶，将氨基酸分解代谢与三羧酸（TCA）循环及细胞生物能量代谢连接起来。通过调控谷氨酸/α-酮戊二酸这一关键节点，GLUD1 影响氮代谢处理、氧化还原平衡以及支持氧化代谢的补充（anaplerotic）通量。其活性还通过将谷氨酸代谢与 ATP 生成及线粒体功能相耦联，交叉影响胰岛素分泌与神经递质稳态等通路。GLUD1 的失调与氨基酸代谢相关疾病及神经内分泌表型有关，因此是研究人类细胞代谢调控的重要靶点。
GLUD1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 GLUD1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对GLUD1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏GLUD1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了GLUD1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。