Glucose Transporter Glut1 Double Nickaseプラスミド (m): sc-422998-NIC
- 対象生物種: mouse
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Glucose Transporter Glut1 Double Nickaseプラスミド (m)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Glucose Transporter Glut1ダブルニカースプラスミド（m）およびGlucose Transporter Glut1ダブルニカースプラスミド（m2）は、Slc2a1を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Glucose Transporter Glut1 Double Nickaseプラスミド (m) | sc-422998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glucose Transporter Glut1 Double Nickaseプラスミド (m2) | sc-422998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc2a1 は促進拡散型グルコーストランスポーター GLUT1（SLC2A1）をコードしており、GLUT1 は高親和性のトランスポーターとして、多くのマウス細胞種（内皮系や免疫系の系譜を含む）において、形質膜を介した基礎的なグルコース取り込みを担います。細胞内のグルコース利用可能性を制御することで、GLUT1 は解糖系、酸化的代謝、ならびに細胞増殖、レドックス恒常性、ストレス応答に影響する生合成経路を支えます。Slc2a1 の発現と GLUT1 のトラフィッキングは、栄養感知および低酸素シグナルによって厳密に制御され、HIF 依存的な転写プログラムやエネルギー恒常性ネットワークなどの経路からのシグナルを統合します。GLUT1 活性の変化は、増殖性および炎症性の状況における代謝再プログラムと関連しており、Slc2a1 は神経血管機能、免疫代謝、ならびにグルコース輸送異常のモデルで広く研究されています。
Glucose Transporter Glut1 ダブルニカースプラスミド（m）は、mouse 細胞株における Slc2a1 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、Slc2a1内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、Slc2a1の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、Slc2a1が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。