GLTSCR1 Plasmide Double Nickase (h): sc-409913-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- GLTSCR1 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h) e il GLTSCR1 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira GLTSCR1. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: GLTSCR1 Antibody (H-10): sc-515086
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
GLTSCR1 Plasmide Double Nickase (h) | sc-409913-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLTSCR1 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-409913-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GLTSCR1 (glioma tumor suppressor candidate region gene 1) codifica una proteina nucleare implicata nella regolazione di processi associati alla cromatina e nel controllo trascrizionale, in linea con un ruolo nel mantenimento di corretti programmi di espressione genica. Interazioni riportate collegano GLTSCR1 a complessi epigenetici regolatori e a vie che influenzano la progressione del ciclo cellulare, le risposte al danno del DNA e gli stati di differenziamento cellulare. Un’alterazione dell’espressione di GLTSCR1 o perturbazioni genomiche sono state associate a contesti correlati ai tumori, in particolare in regioni associate al glioma, a sostegno della sua rilevanza nello studio dei meccanismi di riprogrammazione trascrizionale oncogenica. In quanto gene umano, GLTSCR1 viene spesso esaminato in modelli che indagano l’organizzazione nucleare, la regolazione della cromatina e le relazioni genotipo-fenotipo nella biologia delle malattie proliferative.
GLTSCR1 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus GLTSCR1 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di GLTSCR1. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di GLTSCR1. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con GLTSCR1 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.