Ggnbp2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (m): sc-432161

Panoramica

Ggnbp2 (proteina 2 legante la gametogenetina) è una proteina associata alle cellule germinali implicata nella biologia riproduttiva maschile, con un arricchimento riportato nei tessuti testicolari e collegamenti a processi legati alla spermatogenesi. Sebbene i suoi partner molecolari rimangano definiti solo in parte, Ggnbp2 è stata associata alla regolazione di programmi trascrizionali e degli stati di differenziamento nella linea germinale. La perturbazione di geni attivi in questo contesto può influenzare l’organizzazione della cromatina, la progressione meiotica e lo sviluppo degli spermatozoi, rendendo Ggnbp2 di interesse per lo studio delle vie alla base della fertilità e dell’omeostasi delle cellule germinali. Pattern di espressione alterati di regolatori arricchiti nel testicolo come Ggnbp2 vengono inoltre esaminati nel contesto di un controllo aberrante del ciclo cellulare e di un differenziamento deregolato in modelli rilevanti per la patologia.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO Ggnbp2 (m) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene Ggnbp2 in linee cellulari mouse. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del Ggnbp2 insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto Ggnbp2 a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina Ggnbp2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di Ggnbp2 per lo studio della segnalazione di Ggnbp2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni Ggnbp2 critici per la funzione di Ggnbp2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di Ggnbp2 per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal Ggnbp2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m) e dal Ggnbp2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (m2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus Ggnbp2. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal Ggnbp2 Plasmide HDR (m) e il plasmide HDR Ggnbp2 (m2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia Ggnbp2 per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio Ggnbp2 definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.