Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GCNF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406967
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GCNF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GCNF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GCNF Anticorpo (B-2): sc-271733
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GCNF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406967 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
NR6A1 codifica o germ cell nuclear factor (GCNF), um receptor nuclear órfão que atua principalmente como represssor transcricional durante o desenvolvimento embrionário e na biologia das células germinativas. O GCNF contribui para a especificação de linhagens e para a manutenção de programas de diferenciação ao se ligar a elementos de resposta em promotores-alvo e recrutar complexos correpressores que alteram o estado da cromatina. Em células humanas, redes reguladas por NR6A1 se cruzam com circuitos de pluripotência e diferenciação, incluindo a repressão de genes como POU5F1/OCT4, o que o relaciona ao controle epigenético de transições do desenvolvimento. A atividade desregulada de NR6A1 tem sido investigada em contextos que envolvem diferenciação aberrante e reprogramação transcricional, tornando-o relevante para estudos de distúrbios do desenvolvimento e de plasticidade de células tumorais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GCNF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene NR6A1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do NR6A1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do NR6A1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GCNF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de NR6A1 para a investigação da sinalização de GCNF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) NR6A1 críticos para a função GCNF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos NR6A1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GCNF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo GCNF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus NR6A1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GCNF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR GCNF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia NR6A1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo NR6A1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.